cellabs 02-019-01说明书
cellabs代理——上海起发
免疫检测试剂盒
包涵体肝炎的反应
5 x 96井测试套件
储存在2-8摄氏度
目录
5 x 96孔FAdv-8抗原涂层微孔板
1 x 100mL瓶ELISA稀释液浓缩液10x(蓝色
解决方案)
7 x 0.08mL标准瓶(平盖)
1 x 0.3mL小瓶抗鸡HRP结合物(蓝帽)
1瓶250mL洗涤缓冲液浓缩液(20x)
1 x 3.0mL基质浓缩物(20x)
1 x 60mL基质缓冲液
1 x 30mL停止溶液
方法
准备所有步骤均在室温下进行。
使用前,确保微量滴定板和所有试剂处于室温。
以下所示数量是指使用一块板所需的数量。
为了制备ELISA稀释液,将15 ml浓缩物添加到135 ml蒸馏水中。
为了制备洗涤缓冲液,稀释25mL或从x20分配瓶中分配一份溶液到500 ml洗涤瓶中,并用蒸馏水填充至刻度。
平板布局:平板上有足够的空间放置80个测试样品(每个孔一个样品),两行放置7个标准血清样品(一式两份)。请参考建议的标准板布局。
1、样品稀释:将10uL样品加入1mL ELISA稀释液(1x)中,以1:100的比例稀释测试样品和每个标准血清。混合均匀。预稀释的标准品和样品可在4℃下储存两周。
2、样品添加。向孔中加入50uL每个稀释样品。添加50uL各稀释标准血清。通过添加50uL ELISA稀释液(1x)包括空白孔。建议的平板布局如图1所示。标准1为非反应器(阴性对照),标准7为高滴定度样品(阳性对照)。
培养板在室温下在潮湿容器中培养1小时。
4、清洗板使用1x清洗缓冲液清洗板三次。如果不使用自动洗板机,轻弹盘子清空内容物,并立即使用清洗瓶清洗水井三次。轻拍干燥实验室纸巾,去除残留物。
5、共轭物的稀释和添加。
将50uL结合物加入6mL ELISA稀释液(1x),以1:120的比例稀释结合物。混合均匀。向每个孔中添加50uL稀释共轭物。
6.按照步骤3进行孵化。
7.按照步骤4清洗盘子。
8.TMB基板的添加。
通过将0.6 mL浓缩物添加到11.4 mL基质缓冲液(足以容纳1个平板)中来稀释基质浓缩物。混合均匀。向每个孔中添加100uL基质。
9、显色。
室温下在黑暗中培养15分钟。
10、停止反应。向每口井中加入50uL停止溶液。
11、阅读
在450 nm的单波长或450/620nm的双波长下读取条带。
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