促红细胞生成素（EPO) 是一种高度糖基化的蛋白质，分子量约为 30,000 - 34,000 道尔顿。人EPO是一种由165个氨基酸组成的多肽，含有一个O-连接和三个N-连接的碳水化合物链。重组 EPO 是用于免疫分析的天然蛋白质的良好替代品。血清 EPO 水平取决于蛋白质的产生率和清除率。90% 的 EPO 是在成人肾脏的管周细胞中产生的，以响应组织氧合的减少。有证据表明，这些细胞上检测血液氧饱和度的蛋白质是含血红素的部分。随着血浆的 pO2（血细胞比容的函数）降低，EPO 浓度将增加。

血清促红细胞生成素浓度的定量可作为确定贫血或红细胞增多症原因的诊断辅助手段。再生障碍性贫血、溶血性贫血和缺铁性贫血都会导致血清EPO升高。然而，由于肾功能衰竭和其他疾病如获得性免疫缺陷综合征 (AIDS) 引起的继发性贫血患者的 EPO 水平通常低于贫血程度。这很可能是由于患病肾脏产生足量 EPO8 的能力受损所致。低浓度的 EPO 可能会发出肾移植排斥反应的早期预警。EPO 还可用于监测接受齐多夫定 (AZT) 治疗的艾滋病患者。EPO 浓度增加证实与 AZT 治疗相关的贫血是由于红细胞发育不全或发育不全。

真性红细胞增多症或原发性红细胞增多症（红细胞量增加）是由于未受刺激的红细胞过度产生所致。因此，血红蛋白的增加会导致 EPO 的产生减少，从而导致血清 EPO 水平低于正常水平。继发性红细胞增多症也以总红细胞量增加为特征，是对组织缺氧引起的循环 EPO 水平升高的生理反应。缺氧可能是由于肺纤维化、心血管疾病、长期暴露于高海拔、血红蛋白异常或药物治疗等因素造成的。一些肿瘤会产生 EPO，在这些情况下，EPO 可用作肿瘤标志物来监测治疗效果。

物种：人类

样品类型：  血清

样品量：  200 uL

标准曲线范围：  7.5 - 500 mU/mL

灵敏度：  1.2 mU/mL

检测时长：   2.5 小时

EPO 免疫测定是一种双位点 ELISA（酶联免疫吸附测定），用于测量 EPO 的生物活性 165 个氨基酸链。它利用两种不同的小鼠单克隆抗体对抗人类 EPO，对 EPO 分子上明确定义的区域具有特异性。一种针对人 EPO 的小鼠单克隆抗体被生物素化，另一种针对人 EPO 的小鼠单克隆抗体用辣根过氧化物酶 (HRP) 进行标记以进行检测。 

在该测定中，校准品、对照品或患者样品在链霉亲和素包被的微孔板中与酶标抗体和生物素偶联抗体同时孵育。在测定温育结束时，洗涤微孔以除去未结合的成分，并将结合到固相的酶与底物四甲基联苯胺 (TMB) 温育。然后加入酸性终止溶液以终止反应并将颜色转化为黄色。黄色的强度与样品中 EPO 的浓度成正比。使用从校准器获得的结果生成吸光度单位与浓度的剂量响应曲线。对照和患者样品中存在的 EPO 浓度直接从该曲线确定。这些标准已经根据世界卫生组织 (WHO) 促红细胞生成素国际标准进行了校准，该标准由重组 DNA 衍生的 EPO 组成。使用的 WHO 参考标准是促红细胞生成素第一国际标准 (87/684)。