产品描述

PNGase F，肽N糖苷酶F，N-糖苷酶，N-糖苷酶

从含有Elizabethkingia miricola基因克隆的大肠杆菌菌株中分离重组PNGaseF。与天然酶（E-PNG01）相比，重组酶的活性或比活性没有可检测的差异。

PNGase F从糖蛋白上裂解天冬酰胺连接的（N连接的）寡糖。PNGase F将天冬酰胺脱氨为天冬氨酸，使寡糖保持完整。变性可将裂解速率提高至100倍。大多数天然蛋白质仍然可以*被N-去糖基化，但是必须增加孵育时间。PNGase F在孵育条件下将保持活性至少72小时。PNGase F不会去除通常在植物糖蛋白上发现的含有Alpha-（1,3）连接的核心岩藻糖的寡糖；为此，请使用肽N-糖苷酶A。

PNGase F在大肠杆菌中来自伊丽莎白的源重组PNGase F基因

EC 3.5.1.52

内容
60的重组PNG酶F（0.3 U）在20mM的Tris-HCl微升等分试样，pH 7.5中
包含用20μL和60μL包尺寸
5倍PNG酶˚F反应缓冲液7.5 PNG酶的F - 250 mM磷酸钠，pH 7.5中
PNG酶˚F变性解决方案– 2％SDS，1 M Beta-巯基乙醇
PNGase F Triton X-100 – 15％解决方案

比活度> 25 U / mg

活性5 U / ml

分子量35,000道尔顿

PNGase F 6-10的pH范围，最佳7.5

PNGase F建议用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去离子水将最终体积调整为35 µl。
2.加入10 µl 5x PNGase F反应缓冲液7.5和2.5 µl PNGase F变性溶液。在100°C加热5分钟。
3.酷。加入2.5 µl PNGase F Triton X-100并混合。
4.在反应中加入2.0 µl PNGaseF。在37°C下孵育3小时。

特异性PNGase F从糖蛋白上裂解天冬酰胺连接的（N连接的）寡糖。PNGase F将天冬酰胺脱氨为天冬氨酸，使寡糖保持完整。变性可将裂解速率提高至100倍。大多数天然蛋白质仍然可以*被N-去糖基化，但是必须增加孵育时间。PNGase F在孵育条件下将保持活性至少72小时。PNGase F不会去除通常在植物糖蛋白上发现的含有Alpha-（1,3）连接的核心岩藻糖的寡糖；为此，请使用肽N-糖苷酶A。

比活性定义为在37°C，pH 7.5的情况下，在1分钟内催化从1微摩尔RNase B释放N-连接的寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割（切割的RNase B迁移更快）。

储存将酶保存在4˚C下​​。